南京科恩里斯生物医药有限公司吴庭鹤获国家专利权
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龙图腾网获悉南京科恩里斯生物医药有限公司申请的专利细胞来源外泌体亚群的制备方法及产品和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121379949B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511964498.8,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权细胞来源外泌体亚群的制备方法及产品和应用是由吴庭鹤;张晓东;冯梦设计研发完成,并于2025-12-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本细胞来源外泌体亚群的制备方法及产品和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种细胞来源外泌体亚群的制备方法及产品和应用,属于生物医药技术领域。该制备方法包括:细胞培养液过滤,得细胞培养上清液;用300‑500kDa中空纤维过滤器的切向流系统,浓缩5‑30倍,洗滤10‑20倍,得到浓缩液;经SephacrylS‑400HR凝胶过滤柱层析,收集两个280nm紫外吸收峰洗脱液,获外泌体亚群S1和S2;所述的浓缩液的上样蛋白浓度为20‑50mgmL。本发明首次实现外泌体功能性亚群精准分离,S1亚群免疫调节活性强,S2亚群促细胞再生效果优,且工艺普适性高、可规模化生产。该亚群可用于制备免疫调节或促进细胞再生药物,为相关疾病治疗提供精准技术方案。
本发明授权细胞来源外泌体亚群的制备方法及产品和应用在权利要求书中公布了:1.一种细胞来源外泌体亚群的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包括如下步骤: 步骤1细胞培养液过滤,得到细胞培养上清液;所述的过滤的载量为150-300Lm2,过滤的流速为100-300LMH;所述的过滤为使用双层复合结构滤膜进行过滤,所述的双层复合结构为上层1.5μm+下层0.8μm; 步骤2细胞培养上清液采用300-500kDa中空纤维过滤器的切向流过滤系统,浓缩5-30倍,洗滤15-20倍,得到浓缩液; 步骤3浓缩液通过SephacrylS-400HR凝胶过滤柱进行层析分离,所述的层析分离过程包括:平衡,上样浓缩液,洗脱,在位清洗; 所述的平衡包括:使用缓冲液平衡SephacrylS-400HR凝胶过滤柱;在所述的平衡步骤中,所述的缓冲液的体积为1-3CV,流速为20-40cmh; 所述的上样浓缩液包括:20-50mgmL蛋白浓度的浓缩液,上样体积为SephacrylS-400HR凝胶过滤柱体积的2%-5%,流速5-15cmh,进行上样; 所述的洗脱包括:使用缓冲液洗脱SephacrylS-400HR凝胶过滤柱,流速5-15cmh,280nm处紫外信号上升开始收集,接近基线水平时停止收集,收集50-500mAU区间洗脱液和500-200mAU区间洗脱液,得到细胞来源外泌体亚群S1和细胞来源外泌体亚群S2; 所述的在位清洗包括使用NaOH溶液冲洗; 步骤1中所述的细胞为哺乳动物细胞; 步骤2中所述的中空纤维过滤器的材质包括:聚砜、聚醚砜、磺化聚砜中的任意一种或多种。
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