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龙图腾网获悉南京农业大学申请的专利一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119673268B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411770133.7，技术领域涉及：G16B15/30；该发明授权一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法是由吕凤霞;马斌;朱萍;池慧兵;牛家峰;朱筱玉;沈娟;陆兆新设计研发完成，并于2024-12-04向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术和酶工程技术领域，涉及一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法，是通过组建醛酮还原酶AKR13B3的底物文库和分析动力学参数；对构建醛酮还原酶AKR13B3和辅酶NADPH以及底物3‑keto‑DON的复合结构进行loop结构分析以及氨基酸序列比对来确定突变位点，筛选底物特异性增加的突变体；本发明通过对AKR13B3底物结合袋的入口环区域的几何形状进行了设计，以改变底物偏好性，实现该酶对特定底物的催化活性增加；此外，本发明为设计具有良好底物特异性的醛酮还原酶提供了一个可行的方案，为开发高效酶制剂提供了巨大的希望。

本发明授权一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法在权利要求书中公布了：1.一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法，其特征在于：包括如下步骤： S1、组建醛酮还原酶AKR13B3的底物文库，底物文库包含3-keto-DON、丙醛、丁醛、糠醛、戊二醛、苯甲醛； S2、通过在1-500μM底物浓度下测定反应速率，使用GraphPadPrism8软件对米氏方程进行拟合，分析醛酮还原酶AKR13B3对不同底物的动力学参数、、； S3、通过AlphaFold服务器确定醛酮还原酶AKR13B3和辅酶NADPH复合物的蛋白质结构，通过Chem3D20.0绘图软件或ZINC数据库获得底物3-keto-DON的三维结构，采用AutoDockVina1.2.3软件将醛酮还原酶AKR13B3与底物3-keto-DON进行分子对接，构建醛酮还原酶AKR13B3和辅酶NADPH以及底物3-keto-DON的复合结构； S4、对复合结构进行loop结构分析，确定底物3-keto-DON结合口袋周围的loopA、loopB、loopC、loopD结构，用丙氨酸扫描方法找出loopA、loopB、loopC结构内的潜在突变位点，从中筛选出能降低空间阻碍效应的突变位点：F25、T31、P39、S97、Q101、P103、P104、L105、F211、M251，并突变为缬氨酸或甘氨酸；此外，用醛酮还原酶AKR13B3的序列与Devosiasp.D6-9菌株的AKR13B2的序列进行氨基酸序列比对，从loopD中选择不保守残基作为突变位点； S5、对筛选出的能降低空间阻碍效应的突变位点进行组合诱变，获得突变体T31VQ101AP103G，以提高醛酮还原酶对3-keto-DON底物特异性和催化效率。

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