北京泰德制药股份有限公司齐连权获国家专利权
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龙图腾网获悉北京泰德制药股份有限公司申请的专利一种蛋白卵磷脂化修饰的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN109422796B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201710786719.6,技术领域涉及:C07K1/107;该发明授权一种蛋白卵磷脂化修饰的方法是由齐连权;常翠云;李辰霄;孙涛;贾慧设计研发完成,并于2017-09-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种蛋白卵磷脂化修饰的方法在说明书摘要公布了:本发明属于蛋白质医药生物工程与技术领域,公开了一种蛋白卵磷脂化修饰的方法。该方法将含无机盐的缓冲体系、被修饰蛋白、磷脂酰胆碱活性酯的有机溶液在4℃‑30℃下混匀,静置修饰0.1h~96h。本发明所述蛋白卵磷脂化修饰的方法可以提高蛋白卵磷脂化修饰的效率,同时提高修饰后的卵磷脂化蛋白的收率和纯度。
本发明授权一种蛋白卵磷脂化修饰的方法在权利要求书中公布了:1.一种超氧化物歧化酶卵磷脂化修饰的方法,其特征在于,将含无机盐的缓冲体系、超氧化物歧化酶、含磷脂酰胆碱活性酯的有机溶液在室温下混匀,此时,依次按照含无机盐的缓冲体系、超氧化物歧化酶、含磷脂酰胆碱活性酯的有机溶液的顺序加入后混匀,静置修饰2h~36h;所述磷脂酰胆碱活性酯与超氧化物歧化酶的质量比为0.16:1;按gL计,所述含无机盐的缓冲体系、溶解磷脂酰胆碱活性酯的有机溶剂的体积比为0.1:0.1;所述超氧化物歧化酶为含有游离伯胺基团的蛋白; 所述含无机盐的缓冲体系中所述缓冲体系为tris盐酸缓冲体系,pH值为8.0±0.2;所述无机盐选自氯化钠,浓度为20mM;所述溶解磷脂酰胆碱活性酯的有机溶剂为98%或99%的乙醇; 所述修饰完成后还包括离子交换柱层析纯化和用含无机盐的缓冲体系超滤置换有机溶剂的步骤; 所述离子交换柱层析纯化的层析柱填料为阴离子交换填料;所述纯化具体为将修饰后的蛋白溶液装入层析柱后,使用流动相A溶液进行初步清洗,再用流动相B溶液进行洗脱收集,所述流动相A由含20mMNaCl的40mMTris缓冲液和乙醇组成,乙醇比例为60%,缓冲液pH值为8.0±0.2,所述流动相B由含200mMNaCl的40mMTris缓冲液和乙醇组成,乙醇比例为60%,缓冲液pH值为8.0±0.2; 所述含无机盐的缓冲体系超滤置换有机溶剂的步骤中置换方法为切向流膜包超滤,所述含无机盐的缓冲体系为5~10mMTris缓冲液,缓冲体系pH为6~9。
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