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深圳市中医院张伟健获国家专利权

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龙图腾网获悉深圳市中医院申请的专利一种胃黏膜IM伴SPEM类器官模型及其构建方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121182735B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511735205.9,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种胃黏膜IM伴SPEM类器官模型及其构建方法和应用是由张伟健;郭绍举;许艺飞;李海文;洪欣欣;姜小艳;蔡甜甜;潘华峰设计研发完成,并于2025-11-25向国家知识产权局提交的专利申请。

一种胃黏膜IM伴SPEM类器官模型及其构建方法和应用在说明书摘要公布了:本发明提供一种胃黏膜IM伴SPEM类器官模型及其构建方法和应用,属于生物学技术领域。本发明所述构建方法包括:对小鼠骨髓源性巨噬细胞极化刺激,将极化刺激后的巨噬细胞与小鼠胃类器官共培养。经该方法构建的胃黏膜IM伴SPEM类器官模型可高度模拟人体胃黏膜在慢性炎症微环境驱动下胃“炎‑癌”转化的关键病理过程,精准再现正常胃黏膜从慢性非萎缩性胃炎向萎缩性胃炎、SPEM及IM病变转化的发展路径。该模型整合了免疫信号、上皮细胞损伤应答、干细胞命运重编程等多维度调控网络,可动态监测巨噬细胞与胃上皮细胞间的相互作用机制,弥补了传统IM细胞模型难以模拟体内复杂微环境和解析细胞间对话机制的技术缺陷。

本发明授权一种胃黏膜IM伴SPEM类器官模型及其构建方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种胃黏膜肠上皮化生IM伴解痉多肽表达化生SPEM类器官模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤: 步骤一、小鼠骨髓源性巨噬细胞获取与基础培养:于实验起始日第1天,无菌分离C57BL6J小鼠股骨和胫骨,冲出骨髓细胞,经红细胞裂解后,将细胞重悬于含10-30ngmlM-CSF、5-15%FBS和0.5-1.5%双抗的DMEM高糖培养基中,接种于Transwell上室,上室架到空的6孔板上,在培养箱中培养,诱导分化为成熟的、未极化的M0型巨噬细胞; 步骤二、小鼠胃类器官提取与初代培养:同步于第1天,解剖获取小鼠胃体部黏膜组织,经EDTA消化、机械解离、过滤后,将获得的胃腺上皮细胞或细胞团块包埋于基质胶中,接种于共培养的没有上室的6孔板的Transwell下室,加入含有关键因子8-12µMY-27632、8-12µMSB431542、8-12µgml庆大霉素的胃类器官条件培养基,在培养箱中培养;小鼠胃类器官常规培养:小鼠胃类器官在培养的第1-6天内,每48h全量更换新鲜胃类器官条件培养基; 步骤三、小鼠胃类器官与M2型骨髓源性巨噬细胞的共培养 ①上述步骤一和步骤二分开同时培养;其中第6天对小鼠骨髓源性巨噬细胞极化刺激与小鼠胃类器官传代培养分别同步进行,继续培养48h;所述极化刺激为弃去旧培养基,加入含有15-25ngmlIL-4和15-25ngmlIL-13的含5-15%FBS的DMEM高糖培养基刺激48h后,即可构建M2型骨髓源性巨噬细胞; ②第8天开始动态共培养启动与维持 第8天共培养体系建立:在小鼠骨髓源性巨噬细胞完成48h极化刺激后,弃去小鼠胃类器官Transwell下室和M2型骨髓源性巨噬细胞Transwell上室中的旧培养基;向小鼠胃类器官所在的Transwell下室孔中加入新鲜的胃类器官条件培养基;将含有M2型骨髓源性巨噬细胞的Transwell上室嵌入已放置胃类器官下室的培养板中,向上室加入不含极化因子IL-4和IL-13但含5-15%FBS的DMEM高糖培养基;于37-39℃、3-7%CO2浓度下培养至3天,得胃黏膜IM伴SPEM类器官模型; 动态维持机制:在共培养开始后,每3天弃去旧的M2型骨髓源性巨噬细胞上室,连同其中的培养基和细胞,更换为一个新鲜制备、已完成相同极化刺激48h的M2型骨髓源性巨噬细胞上室,下室胃类器官的培养基按每48h更换为新鲜的胃类器官条件培养基; 所述共培养的条件包括:于37-39℃、3-7%CO2浓度下培养3-9天; 所述胃类器官条件培养基为L-WRN条件培养基。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人深圳市中医院,其通讯地址为:518000 广东省深圳市福田区福田街道福华路1号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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