河北大学;北京科技大学张江艳获国家专利权
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龙图腾网获悉河北大学;北京科技大学申请的专利基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法及产品获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121208326B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511388868.8,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法及产品是由张江艳;李庆;王辉;成永强设计研发完成,并于2025-09-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法及产品在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法及产品。该方法通过捕获抗体特异性结合待检测的蛋白标志物,并通过修饰有HRP的检测抗体或修饰有HRP的二抗和检测抗体特异性结合蛋白标志物,形成免疫复合物,向含有免疫复合物的体系中加入H2O2和同时负载有寡核苷酸引发序列和酪胺的纳米双功能复合物,利用HRP催化的酪胺沉积反应,使纳米双功能复合物在免疫复合物上及周围区域进行沉积并富集,通过寡核苷酸引发序列引发环介导等温扩增,实现对蛋白标志物的实时定量检测。本发明方法通过纳米双功能复合物将酪胺沉积信号放大与环介导等温扩增有效衔接,在低丰度蛋白标志物检测中具有显著灵敏度优势。
本发明授权基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法及产品在权利要求书中公布了:1.一种基于纳米双功能复合物和环介导等温扩增的蛋白标志物检测方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、制备免疫复合物:在载体上固定捕获抗体,分步或同步引入待测的蛋白标志物和修饰有HRP的检测抗体,进行特异性反应,制得结构为捕获抗体蛋白标志物检测抗体-HRP的免疫复合物; 或,在载体上固定捕获抗体,分步或同步引入待测的蛋白标志物、检测抗体、修饰有HRP的二抗,进行特异性反应,制得结构为捕获抗体蛋白标志物检测抗体二抗-HRP的免疫复合物; S2、酪胺沉积反应:向步骤S1所得体系中加入纳米双功能复合物和H2O2,所述纳米双功能复合物同时负载有寡核苷酸引发序列和酪胺,在H2O2存在下HRP催化酪胺发生沉积反应,使所述纳米双功能复合物沉积并富集到所述免疫复合物上及其周围区域; S3、核酸扩增反应:向步骤S2所得体系中加入环介导等温扩增反应体系,所述寡核苷酸引发序列启动环介导等温扩增反应,以实现对所述蛋白标志物的检测; 所述环介导等温扩增反应体系包括:茎环探针1、茎环探针2、引物FP、引物BP; 所述引物FP为具有SEQIDNO.3所示的核苷酸序列,所述引物BP为具有SEQIDNO.4所示的核苷酸序列; 所述寡核苷酸引发序列与茎环探针1中的对应序列互补杂交,以触发环介导等温扩增反应。
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