中国科学院大学余志晟获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院大学申请的专利一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116334150B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310277499.X,技术领域涉及:C12P7/10;该发明授权一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺是由余志晟;王聪;常冬冬;张琦;张洪勋设计研发完成,并于2023-03-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺在说明书摘要公布了:本发明公开了一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺。属于电化学技术领域。本发明首先将废弃纤维素热解后进行pH调节,接着配制适合大肠杆菌生长的盐溶液,并在发酵和电化学转化的反应体系中加入抗生素,将制成的大肠杆菌反应体系在无菌发酵的条件下接入电化学系统以提供微电压。通过以上过程能够将大部分的内醚糖转化为乙醇,并能利用电流还原热解液中的抑制物,提高抑制物的降解率。
本发明授权一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺在权利要求书中公布了:1.一种电活性大肠杆菌利用纤维素热解液制备乙醇的工艺,其特征在于,包括如下步骤: 1将纤维素经预处理得到纤维素热解液; 2在培养基中预置碳刷,之后培养基因工程EscherichiacoliLGE,直至碳刷上附着有大肠杆菌生物膜; 3以附着有大肠杆菌生物膜的碳刷作为微生物电解池的生物阳极,以不锈钢网和碳布为阴极;将经过0.22μm膜过滤除菌的热解液加入灭菌后的M9基础盐培养基为发酵和电化学转化的底物,构建微生物电解池系统; 4调节反应系统的温度为30±1℃,且外加电压,电压为0.4~0.8V; 所述步骤1的具体操作为:用热解装置制备源自废棉的热解物得到热解液,pH调节至7; 所述基因工程EscherichiacoliLGE的构建方法如下: 将左旋葡聚糖利用途径改造到pET-21a载体中,使用EcoRI和XhoI限制性内切酶将合成的lgk基因片段克隆到pET-21a载体中,以生成pET-lgk载体,感受态E.coliBL21DE3通过CaCl2法制备,向感受态细胞中加入pET-lgk载体DNA,然后将混合物转移至电击杯中进行脉冲,将转化的细胞重置于LB培养基中复苏,将重组细胞在添加抗生素的LB平板上培养,引入乙醇生产途径,使用引物将丙酮酸脱羧酶基因pdc和醇脱氢酶基因adh从运动发酵单胞菌基因组DNA中克隆出来,然后用BamHIEcoRI消化测序的adhDNA片段并克隆到pZBC载体中以生产pZBC-adh载体,随后,将两端为NdeI和BamHI限制性位点的测序pdcDNA片段进一步克隆至pZBC-adh载体中,以生成pZBC-adh-pdc载体,使用T7lac启动子的核糖体结合位点序列添加到lgk和adh的50上游,通过PCR扩增和测序验证分离纯化的重组菌株。
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