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龙图腾网获悉深圳大学申请的专利一种双光子荧光多色成像系统及方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114965399B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210530460.X，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种双光子荧光多色成像系统及方法是由严伟;黄仰锐;王璐玮;郭勇;高欣慰;罗腾;屈军乐设计研发完成，并于2022-05-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种双光子荧光多色成像系统及方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种双光子荧光多色成像系统及方法，包括激光组件、双色镜、采集组件、载物台、滤波器、光电倍增管以及成像装置，激光组件与双色镜之间具有第一光路，双色镜与载物台之间具有第二光路，采集组件设置于第二光路上，双色镜与成像装置之间具有第三光路，第三光路自双色镜依次经过滤波器、光电倍增管至成像装置；激光组件，用于产生激发光；双色镜，用于透射激发光，反射荧光信号；滤波器，用于透过特定波长范围的荧光信号，滤除杂散光信号；成像装置，用于数据交换，并对数据进行处理生成图像。本发明利用单激发波长实现双光子的多色成像，能够有效简化光路复杂性和造价成本。

本发明授权一种双光子荧光多色成像系统及方法在权利要求书中公布了：1.一种双光子荧光多色成像系统，其特征在于，包括激光组件、双色镜、采集组件、载物台、滤波器、光电倍增管以及成像装置，所述激光组件与所述双色镜之间具有第一光路，所述双色镜与所述载物台之间具有第二光路，所述采集组件设置于所述第二光路上，所述双色镜与所述成像装置之间具有第三光路，所述第三光路自所述双色镜依次经过所述滤波器、所述光电倍增管至所述成像装置；其中， 所述激光组件，用于产生激发光； 所述双色镜，用于透射激发光，反射荧光信号； 所述采集组件，用于采集所述载物台上的样品的荧光信号； 所述载物台，用于放置和固定样品，调节样品三维空间位置； 所述滤波器，用于透过特定波长范围的荧光信号，滤除杂散光信号； 所述光电倍增管，用于探测和收集荧光信号，进行光电转换和信号增强； 所述成像装置，用于数据交换，并对数据进行处理生成图像；对数据进行处理生成图像的过程包括：对荧光信号进行滤波处理得到第一图像信号、第二图像信号以及第三图像信号，并对所述第一图像信号、所述第二图像信号以及所述第三图像信号进行图像相减处理得到第一荧光信号、第二荧光信号与第三荧光信号；所述第一图像信号只包含第一荧光信号；其中，所述荧光信号为对细胞的不同结构进染色标记并利用同种波长的激发光对所述标记进行双光子激发得到的信号；所述图像相减包括：IGREEN=IB-αIDAPI，IORANGE=IC-βIB；其中，IDAPI为第一图像信号的信号强度，IB为第二图像信号的信号强度，IC为第三图像信号的信号强度，IGREEN为第二荧光信号的信号强度，IORANGE为第三荧光信号的信号强度，α和β为差异系数，所述差异系数的取值由对应滤波器下发射光谱速率之和决定，α=∑EBλ∑EAλ，β=∑ECλ∑EBλ，其中E为发射系数；将得到的所述第一荧光信号、所述第二荧光信号与所述第三荧光信号使用图像重建得到三色荧光图像。

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