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龙图腾网获悉浙江龙传生物医药科技有限公司申请的专利人源化KRAS G12D原位肝癌动物模型及其构建方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118575788B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410840423.8，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权人源化KRAS G12D原位肝癌动物模型及其构建方法和应用是由郭淑明;扈荣;张震;陈福鼎;杨文亮;李娇设计研发完成，并于2024-06-27向国家知识产权局提交的专利申请。

本人源化KRAS G12D原位肝癌动物模型及其构建方法和应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种结合人源化原位肝癌裸小鼠和KRASG12D裸质粒转基因的复杂模型，该模型自造模起计算7周即可快速达到100％成瘤，且呈现了近似人类临床肝细胞癌的组织学特徵，适用于肝癌精准治疗的PROTAC靶向蛋白降解剂、小分子药物、小核酸药物和基因治疗领域等新药研发的复杂模型，能实现各种人类致癌基因引起肝癌人源化小鼠的高效和经济建模。

本发明授权人源化KRAS G12D原位肝癌动物模型及其构建方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种人源化KRASG12D原位肝癌动物模型的构建方法，包括步骤： 步骤1：pLC-KRASG12D质粒DNA的设计、放大与纯化； 步骤2：将Huh6人肝母细胞瘤细胞悬液接种裸小鼠肝脏； 步骤3：通过尾静脉HDI二次造模建立人源化KRASG12D转基因原位肝癌小鼠模型； 所述步骤1具体为：以人KRAS基因为参考序列，将核苷酸序列GGT定点突变为GAT获得KRASG12D基因，在所述KRASG12D基因的起始密码子之前加入Kozak序列，在终止密码子5’端加入FLAG标签序列；在5’端设计序列为GGATCC的BamHI酶切位点和在3’端设计序列为CTCGAG的XhoI酶切位点，将包含所述KRASG12D基因的片段连接至具有小鼠肝脏组织特异性启动子与增强子的pLC载体质粒DNA中，转化DH5α感受态细胞，经放大与纯化后获得所述pLC-KRASG12D质粒； 所述步骤3具体为：在步骤2建立的Huh6人源化原位肝癌裸小鼠造模后，通过尾静脉HDI注射pLC-KRASG12D质粒DNA溶液进行二次造模建立所述人源化KRASG12D转基因原位肝癌小鼠模型；所述pLC-KRASG12D质粒DNA溶液的溶剂为生理盐水，注射体积相当于小鼠体重的10%，在5~8秒内注射完毕。

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