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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离-检测一体化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115494137B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211210896.7，技术领域涉及：G01N27/327；该发明授权基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离-检测一体化方法是由傅迎春;李月;马心月;黄俏;应义斌设计研发完成，并于2022-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离-检测一体化方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离‑检测一体化方法。利用纳米通道膜制备获得集成式纳米通道‑电极芯片INEC；以抗体和酶双标记磁珠DLMNPs捕获富集样品溶液中的细菌，并将富集液滴加到INEC表面，施加压力使溶液从纳米通道滤除；未结合细菌的游离DLMNPs被充分除去而DLMNPs‑细菌结合体被截留到INEC表面；在INEC表面滴加酶底物溶液，通过检测酶催化前后的阻抗变化实现细菌的定量检测。本发明协同免疫磁珠和纳米通道“纳滤”实现了干扰物游离磁珠的快速分离和特异信号分子的高效富集，基于INEC的微电解池实现了酶信号分子限域催化信号放大，兼顾了细菌的快速分离和高敏检测，方法简单且电极易批量生产，具有较好的普适性。

本发明授权基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离-检测一体化方法在权利要求书中公布了：1.一种基于集成式纳米通道电极纳滤协同限域酶催化的沙门氏菌分离-检测一体化方法，其特征在于：方法包括以下步骤： 1利用纳米通道膜制备获得集成式纳米通道-电极芯片INEC并用牛血清白蛋白BSA溶液封闭； 2制备抗体和酶双标记磁珠DLMNPs，利用抗体和酶双标记磁珠DLMNPs分离富集待测样品溶液中的目标物获得待测液； 3利用集成式纳米通道-电极芯片INEC对待测液过滤处理并进行检测； 所述步骤1具体为：在纳米通道膜的两表面均溅射形成导电层，两表面的导电层分别经各自的导线和电化学工作站连接，两表面的导电层均设有一部分暴露的导电区域作为电极，然后将溅射导电层后的纳米通道膜用去离子水冲洗并吹干，随后浸没于牛血清白蛋白BSA溶液中常温封闭，再用水冲洗除去多余牛血清白蛋白BSA溶液，从而制成得集成式纳米通道-电极芯片INEC； 所述的纳米通道膜的纳米通道的孔径在0.01-10μm范围内；所述的导电层的材料种类包括但不限于银、金、铂、铜、碳； 所述步骤1中，用质量分数为0.2%的牛血清白蛋白溶液处理吹干后的溅射导电层后的纳米通道膜30min； 所述步骤2具体为： 2.1在羧基化磁珠MNPs-COOH表面修饰抗细菌抗体和酶信号分子，并用牛血清白蛋白BSA溶液封闭，制备获得抗体和酶双标记磁珠DLMNPs； 2.2用抗体和酶双标记磁珠DLMNPs分离富集待测样品溶液中的目标物，再磁分离并多次清洗，获得待测液； 所述步骤2.1制备过程具体如下： 2.1.1配制活化溶液：用含0.01vv%吐温20的4-吗啉乙磺酸缓冲溶液MEST配制1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐NHSS混合溶液，获得活化溶液； 2.1.2用4-吗啉乙磺酸缓冲溶液MEST清洗羧基化磁珠MNPs-COOH，磁分离后分散于步骤2.1.1的活化溶液中，振荡孵育后取出得到羧基活化的磁珠； 2.1.3用含0.01vv%吐温20的硼酸盐缓冲溶液BST清洗步骤2.1.2获得羧基活化的磁珠，磁分离后分散于抗细菌抗体的硼酸盐缓冲溶液BST中，孵育后再补入硼酸盐缓冲溶液BST，振荡偶联得到抗体和酶双标记的磁珠混合液； 2.1.4向2.1.3所得的抗体和酶双标记的磁珠混合液中加入等体积的牛血清白蛋白BSA溶液，反应后磁分离，并用含0.01vv%吐温20的磷酸盐缓冲溶液PBST清洗和重悬沉淀，获得抗体和酶双标记磁珠DLMNPs。

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